通過大量的
小鼠神經(jīng)元細胞培養(yǎng),積累了豐富的培養(yǎng)經(jīng)驗,以及對于其中的難點有了自己的一些見解。
小鼠神經(jīng)元的大小并不能一概而論,應(yīng)該說每個腦區(qū)的神經(jīng)元大小均不一致,就是每個核團的神經(jīng)元大小也不相同,大神經(jīng)元直徑長軸有30-40um,短軸20-25um,中型神經(jīng)元應(yīng)該是長軸20-30um,短軸15左右,小神經(jīng)元長軸10-20um,短軸8um左右。做冰凍切片的并不需要每個神經(jīng)元都觀察,而是觀察每個神經(jīng)核團即可,因此取片應(yīng)該隔二取一或者隔三取二均可。
神經(jīng)元的分離可以選用密度梯度離心的方法進行嘗試,也可以培養(yǎng)免疫吸附來達到自己的目的,免疫吸附的marker選擇也尤其的重要,其會直接影響所分離的效果以及后續(xù)的細胞狀態(tài)。
小鼠神經(jīng)元細胞主要功能:
(1)神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。
?。?)細胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。
?。?)神經(jīng)元的主要功能是接受、整合和傳遞信息,具有興奮性、傳導(dǎo)性和可塑性。
基本特性:
(1)組織來源于正常小鼠腦組織。
?。?)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
?。?)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。