技術(shù)文章
Technical articles小鼠破骨細(xì)胞是指在體外培養(yǎng)的小鼠骨髓細(xì)胞經(jīng)過(guò)處理和分離后得到的細(xì)胞群。這些細(xì)胞具有去骨鈣化和骨吸收的能力，是研究骨代謝、骨疾病等領(lǐng)域的重要細(xì)胞模型。在破骨細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，通常會(huì)用到M-CSF（巨噬細(xì)胞集落刺激因子）及RANKL（受體活化因子K）等因子來(lái)誘導(dǎo)小鼠骨髓細(xì)胞分化成破骨細(xì)胞。破骨細(xì)胞可以產(chǎn)生大量的酸性磷酸酶（ACP）和金屬蛋白酶（MMP），這些酶分解骨基質(zhì)，促進(jìn)骨吸收。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究表明，小鼠破骨細(xì)胞的研究應(yīng)用前景廣闊。首先，破骨細(xì)胞可以用來(lái)研究骨關(guān)節(jié)疾病的發(fā)...
在化合物早期發(fā)現(xiàn)階段，為了初步評(píng)估化合物在體內(nèi)被代謝清除的風(fēng)險(xiǎn)，采用化合物與肝S9在體外共孵育一段時(shí)間后，通過(guò)檢測(cè)藥物濃度的變化來(lái)反映化合物在livermicrosome中的穩(wěn)定性，即為肝S9代謝穩(wěn)定性測(cè)試。作為早期化合物篩選中的重要一環(huán)，準(zhǔn)確地認(rèn)識(shí)該項(xiàng)測(cè)試結(jié)果對(duì)于化合物性質(zhì)的判斷十分重要。由于認(rèn)識(shí)的不足，對(duì)于LMS的結(jié)果極易產(chǎn)生錯(cuò)誤的理解和判斷，下文將就常見(jiàn)的誤區(qū)逐一介紹，并進(jìn)行相應(yīng)的解釋。誤區(qū)：LMS體外固有清除率高的化合物體內(nèi)清除率一定很大很多誤區(qū)的造成是對(duì)體外試驗(yàn)體系...
肝微粒體是體外研究一個(gè)化合物的代謝（酶抑制、清除率和代謝鑒定）以及藥物-藥物相互作用的主要工具。通常根據(jù)特定細(xì)胞色素酶的活性水平來(lái)選擇微粒體。在化合物早期發(fā)現(xiàn)階段，為了初步評(píng)估化合物在體內(nèi)被代謝清除的風(fēng)險(xiǎn)，采用化合物與肝微粒體在體外共孵育一段時(shí)間后，通過(guò)檢測(cè)藥物濃度的變化來(lái)反映化合物的穩(wěn)定性，即為肝微粒體代謝穩(wěn)定性測(cè)試。作為早期化合物篩選中的重要一環(huán)，準(zhǔn)確地認(rèn)識(shí)該項(xiàng)測(cè)試結(jié)果對(duì)于化合物性質(zhì)的判斷十分重要。由于認(rèn)識(shí)的不足，對(duì)于LMS的結(jié)果，非常容易產(chǎn)生錯(cuò)誤的理解和判斷。很多誤區(qū)的...
小鼠破骨細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)過(guò)程中的威脅就是細(xì)胞污染，凡是混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中，對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染。細(xì)胞一旦遭到污染，所有的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都會(huì)變得毫無(wú)意義。因此，及時(shí)檢測(cè)并鑒定出所培養(yǎng)的細(xì)胞是否被污染至關(guān)重要。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室要求保持無(wú)菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室要相對(duì)封閉，潔凈無(wú)塵，設(shè)有緩沖間。對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行定期清掃、紫外消毒是避免細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中由于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境引起細(xì)胞污染的主要措施，此外，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不要放太多雜物，保持實(shí)驗(yàn)室干燥，有利于降低...
在科研實(shí)驗(yàn)中一般用到的現(xiàn)成細(xì)胞系/株，我們只需要進(jìn)行細(xì)胞傳代和保種。然而，這些細(xì)胞系常常由于體外長(zhǎng)期培養(yǎng)，而丟失原有生物學(xué)特性，對(duì)藥物處理的反應(yīng)差距越來(lái)越大。小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞直接從機(jī)體取出的細(xì)胞或從組織獲得的單個(gè)細(xì)胞，并可以在體外進(jìn)行培養(yǎng)。這里的組織主要指：器官、外周血及胚胎等。小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞離體時(shí)間短，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)，且生物性狀尚未發(fā)生很大改變。因此在藥物篩選、細(xì)胞移植、類器官培養(yǎng)、腫瘤研究等眾多領(lǐng)域備受歡迎。但組織消化過(guò)程中常遇到多種問(wèn)題，例如消化不*、...
小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶消化而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶，CK-18免疫熒光鑒定細(xì)胞純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。心肌主動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈。主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自正常小鼠心肌主動(dòng)脈，呈單層扁平分布。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。細(xì)胞來(lái)源于成年小鼠主動(dòng)脈組織，其是組成主動(dòng)脈腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，大多...
大鼠軟骨細(xì)胞分離自正常大鼠軟骨組織，軟骨細(xì)胞主要功能：軟骨是人身體中不會(huì)發(fā)生的組織；骨骼在發(fā)育初期大部分是由軟骨構(gòu)成的；軟骨一般起到承重負(fù)荷，減少關(guān)節(jié)間骨骼摩擦等作用。前面我們講述過(guò)軟骨細(xì)胞的制備方法，但是在制備過(guò)程所使用的試劑有哪些，這你們知道嗎？我相信很多人都是不知道的。下面，欣潤(rùn)生物就來(lái)詳細(xì)講述一二。大鼠軟骨細(xì)胞制備過(guò)程中主要的試劑：1、PBS：每袋加ddH2O定容至1000ml，調(diào)pH7.2，高壓滅菌消毒。2、DMEM細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)液：臨用前根據(jù)需要加10%胎牛血清，1...
小鼠破骨細(xì)胞是骨組織成分的一種，行使骨吸收的功能。破骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞在功能上相對(duì)應(yīng)。二者協(xié)同，在骨骼的發(fā)育和形成過(guò)程中發(fā)揮重要作用。高表達(dá)的抗酒石酸酸性磷酸酶和組織蛋白酶K是破骨細(xì)胞主要標(biāo)志。來(lái)源：破骨細(xì)胞是由骨髓中的髓系祖細(xì)胞分化而成的單核巨噬細(xì)胞相互融合，所形成的多核巨細(xì)胞。早期未成熟的增殖性單核吞噬細(xì)胞被稱為破骨細(xì)胞前體，在化學(xué)因子的作用下進(jìn)入血液循環(huán)，再在基底多細(xì)胞單位所釋放的信號(hào)因子的作用下進(jìn)入骨結(jié)構(gòu)腔體，在各種化學(xué)因子、轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子等信號(hào)因子的刺激下融合為多...
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